CUBIC Series

CUBIC Series

理化学研究所生命システム研究センター,ならびに東京大学大学院医学系研究科の上田泰己教授らによって開発された組織透明化技術「CUBIC」は,マウス全脳や全身の透明化により,1細胞解像度で細胞の働きを網羅的に解析できる技術です。弊社では,この組織透明化に使用するCUBIC試薬を提供しています。

お問い合わせ
製品コード 製品名 容量 SDS / Protocol
T3740CUBIC-L (脱脂、脱色用)25 ml / 100 ml / 500 mlSDSProtocol
T3983CUBIC-R+(N) (屈折率調整用)25 ml / 100 ml / 500 mlSDSProtocol
T3741 CUBIC-R+(M) (屈折率調整用)25 ml / 100 mlSDSProtocol
T3780CUBIC-B (脱灰用)25 ml / 100 mlSDSProtocol
T3781CUBIC-HL (自家蛍光を落としての強力脱脂用)25 ml / 100 mlSDSProtocol
T3782CUBIC-P (灌流用)25 ml / 100 mlSDSProtocol
T3866CUBIC-X1 (肥大化用)25 ml / 100 mlSDSProtocol
T3867CUBIC-X2 (肥大化させての屈折率調整用)25 ml / 100 mlSDSProtocol
M3294Mounting Solution (RI 1.520)(観察用封入剤)50 mlSDSProtocol
M3292Mounting Solution (RI 1.467) (観察用封入剤)50 mlSDSProtocol

製品情報

動物用透明化試薬CUBIC Series

特長


・【ベーシックプロトコール】2種類の試薬に浸すだけでマウス全身,動物各臓器の透明化が可能


CUBIC-L:脱脂・脱色用
CUBIC-R+(N)およびCUBIC-R+(M):屈折率調整用



CUBIC-R+(N)(製品コード:T3983)とCUBIC-R+(M)(製品コード:T3741)の違いについて。


CUBIC-R+(N)は,CUBIC-R+(M)より廉価であることや,CUBIC-R+(M)より成分の結晶が析出しにくいことから,ハンドリングがしやすいものです。透明化サンプル中の蛍光シグナルが減衰することがありますが,浸漬後,数日程度は問題なく観察できます。
CUBIC-R+(M)は,蛍光シグナルの保持がより優れています。ただし,冬場などの低温時は,稀にサンプル内で成分の結晶が析出することがあります。その場合は37℃に数日置くと解消します。
そのため,まずCUBIC-R+(N)でお試し頂いた後,蛍光シグナルが観察できないようならばCUBIC-R+(M)の使用を推奨しております。



・【オプショナルプロトコール】透明化処理の困難であった組織の透明化に適した試薬もご用意


CUBIC-B:骨を含む臓器用
CUBIC-HL:自家蛍光も低減させる,ヒトなどの高脂肪組織の脱脂用



・灌流固定と合わせて灌流させることで更なる透明化処理の効率化


CUBIC-P



・【拡張プロトコール】動物組織を肥大化させつつ透明化させることが可能


CUBIC-X1:組織肥大化用
CUBIC-X2:肥大化した組織のサイズを維持したまま屈折率調整用



・3次元サンプルの均一な染色のためのキットをご用意


CUBIC-HV™1 3D nuclear staining kit:核染色用キット
CUBIC-HV™1 3D immunostaining kit:免疫染色用キット
CUBIC-HV™1 3D immunostaining kit (Casein separately):免疫染色用キット。バッファー中のカゼインが小分けにされているので長期保存に適応。



・蛍光タンパクの蛍光シグナルを保持(CUBIC-HLを除く)



・操作時間をより短縮



・光シート顕微鏡(LSFM)や共焦点レーザー顕微鏡(CLSM)と組み合わせることにより,細胞解像度でのイメージングが可能





使用例


マウス全身透明化


マウス全身透明化

図1. CUBICにより透明化したマウス全身(左),透明化とヨウ化プロピジウム(PI)による染色したマウス全身(右)



《マウス全身透明化の流れ》


マウス全身透明化の流れ

*染色工程は必要に応じて行ってください。




マウス臓器透明化


マウス臓器透明化

図2. CUBICにより透明化したマウス全脳(左),透明化と核染色・免疫組織染色したマウス全脳(右)



《マウス臓器透明化の流れ》


マウス臓器透明化の流れ

*染色工程は必要に応じて行ってください。




生後6週以上の成体マウスのよりスムーズな透明化


《生後6週以上の成体マウスのよりスムーズな透明化の流れ》


生後6週以上の成体マウスのよりスムーズな透明化の流れ

*染色工程は必要に応じて行ってください。




骨を含むマウスの体や臓器の透明化


CUBICによる骨を含むマウスの体や臓器の透明化

《骨を含むマウスの体や臓器の透明化の流れ》


骨を含むマウスの体や臓器の透明化の流れ


ヒトの脳の透明化


ヒトの脳の透明化

ヒトの脳の例



《ヒトの脳の透明化の流れ》


ヒトの脳の透明化の流れ


ヒト組織の強力な透明化


CUBICにより透明化されたヒト組織

ヒトの脳の例



《ヒト組織の強力な透明化の流れ》


ヒト組織の強力な透明化の流れ



使用方法






参考文献

CUBIC-L, CUBIC-R+, CUBIC-B, CUBIC-HL, CUBIC-Pを用いた,
マウス全身・脳・肺・肝臓・肢・腎臓の透明化,マーモセット脳の透明化,ヒト脳・腎臓・肝臓・肺の透明化例
(CUBICによる透明化後の免疫染色プロトコール)
Chemical Landscape for Tissue Clearing based on Hydrophilic Reagents
K. Tainaka, T. C. Murakami, E. A. Susaki, C. Shimizu, R. Saito, K. Takahashi, A. Hayashi-Takagi, H. Sekiya, Y. Arima, S. Nojima, M. Ikemura, T. Ushiku, Y. Shimizu, M. Murakami, K. F. Tanaka, M. Iino, H. Kasai, T. Sasaoka, K. Kobayashi, K. Miyazono, E. Morii, T. Isa, M. Fukayama, A. Kakita, H. R. Ueda, Cell Reports 2018, 24, 2196.

マウス全身・脳・肺の透明化例
Whole-Body Profiling of Cancer Metastasis with Single-Cell Resolution
S. I. Kubota, K. Takahashi, J. Nishida, Y. Morishita, S. Ehata, K. Tainaka, K. Miyazono, H. R. Ueda, Cell Reports 2017, 20, 236.

マウス脳,マーモセット脳の透明化例
Whole-Brain Imaging with Single-Cell Resolution Using Chemical Cocktails and Computational Analysis
E. A. Susaki, K. Tainaka, D. Perrin, F. Kishino, T. Tawara, T. M. Watanabe, C. Yokoyama, H. Onoe, M. Eguchi, S. Yamaguchi, T. Abe, H. Kiyonari, Y. Shimizu, A. Miyawaki, H. Yokota, H. R. Ueda, Cell 2014, 157, 726.

CUBIC灌流による,
マウス全身・心臓・肺・腎臓・肝臓の透明化例
Whole-Body Imaging with Single-Cell Resolution by Tissue Decolorization
K. Tainaka, S. I. Kubota, T. Q. Suyama, E. A. Susaki, D. Perrin, M. Ukai-Tadenuma, H. Ukai, H. R. Ueda, Cell 2014, 159, 911.

CUBIC-X1, CUBIC-X2を用いた,
マウス脳の肥大化例
A three-dimensional single-cell-resolution whole-brain atlas using CUBIC-X expansion microscopy and tissue clearing
T. C. Murakami, T. Mano, S. Saikawa, S. A. Horiguchi, D. Shigeta, K. Baba, H. Sekiya, Y. Shimizu, K. F. Tanaka, H. Kiyonari, M. Iino, H. Mochizuki, K. Tainaka, H. R. Ueda, Nat. Neurosci. 2018, 21, 625.

CUBICのヒト病理組織診断への応用例
CUBIC pathology: three-dimensional imaging for pathological diagnosis
S. Nojima, E. A. Susaki, K. Yoshida, H. Takemoto, N. Tsujimura, S. Iijima, K. Takachi, Y. Nakahara, S. Tahara, K. Ohshima, M. Kurashige, Y. Hori, N. Wada, J. Ikeda, A. Kumanogoh, E. Morii, H. R. Ueda, Sci. Rep. 2017, 7, 9269.

CUBIC-HV™キットによる全臓器・全身スケールの3次元組織染色・観察
Versatile whole-organ/body staining and imaging based on electrolyte-gel properties of biological tissues
E. A. Susaki, C. Shimizu, A. Kuno, K. Tainaka, X. Li, K. Nishi, K. Morishima, H. Ono, K. L. Ode, Y. Saeki, K. Miyamichi, K. Isa, C. Yokoyama, H. Kitaura, M. Ikemura, T. Ushiku, Y. Shimizu, T. Saito, T. C. Saido, M. Fukayama, H. Onoe, K. Touhara, T. Isa, A. Kakita, M. Shibayama, H. R. Ueda, Nat. Commun. 2020, 11, 1982.