CUBIC-HV
CUBIC-HV
ชุดอุปกรณ์สารทดลองย้อมสีเนื้อเยื่อแบบ 3 มิติ
CUBIC-HV เป็นเทคโนโลยีใหม่ซึ่งเป็นการพัฒนาครั้งสำคัญที่ทำให้สามารถย้อมสีเนื้อเยื่อแบบ 3 มิติและเฝ้าสังเกตได้ในอวัยวะภายในทั้งหมดทั่วร่างกาย (ซึ่งพัฒนาโดย ศ.อูเอดะ และ รศ.ชูซากิแห่งสถาบันวิจัย RIKEN มหาวิทยาลัยโตเกียว) โปรโตคอลนี้เป็นการนำเสนอวิธีการย้อมสีเนื้อเยื่อแบบ 3 มิติที่มีประสิทธิภาพสูง บริษัท CUBICStars จำกัด มีใบอนุญาตทางด้าน CUBIC-HV และได้ผลิตชุดอุปกรณ์สารทดลองดังกล่าวอยู่ โดยได้จัดเตรียมผลิตภัณฑ์ไว้ 2 รายการตามวิธีการนำไปใช้
ข้อมูลผลิตภัณฑ์
ชุดอุปกรณ์สารทดลองย้อมสีเนื้อเยื่อแบบ 3 มิติ
CUBIC-HV™1 3D Immunostaining kit (product code: C3708)
Process outline
Delipidation
Perfusion fixation and dissection of the mouse brain
Post-fix <24 h
Wash (PBS) 2 h x3
Delipidation (CUBIC-L; Product No. T3740) 3-7 days
Wash (PBS) 2 h x3
Nuclear staining by CUBIC-HV™1 3D nuclear staining kit (Product No. C3709)
Nuclear staining (DAPI or Propidium Iodide or others in CUBIC-HV™1 3D nuclear staining buffer) 3-5 days
Wash (3D nuclear staining wash buffer; 10mM HEPES buffer, pH 7.5) 2 h x3
Optional process; Enzyme reaction
Immunostaining by CUBIC-HV™1 3D immunostaining kit (Product No. C3708)
Primary antibody (anti-NeuN antibody in C3708 kit can be used): 5 µg/whole brain
Secondary antibody: anti-Fc Fab (out of the kits), 3.75 µg/whole brain
Primary antibody + secondary antibody reaction / Replacement with CUBIC-HV™1 3D immunostaining buffer, 1.5 h
Immunostaining (CUBIC-HV™1 3D immunostaining buffer with CUBIC-HV™1 3D immunostaining additive (if required)), >1 week
Reaction in the same buffer at 4°C, 1 day
Wash (CUBIC-HV™1 3D immunostaining wash buffer), 2 h x3
Fix and RI matching
Post-fix (in 1% Formaldehyde Solution), 1 day
Wash (PBS) 2 h
RI matching (CUBIC-R+; Product No. T3740), <3 days
Microscopic observation
Related Products
T3740 Tissue-Clearing Reagent CUBIC-L [for delipidation and decoloring]
T3741 Tissue-Clearing Reagent CUBIC-R+ [for RI matching]
C3708 CUBIC-HV™1 3D immunostaining kit
F0622 37% Formaldehyde Solution
H0396 HEPES
CUBIC-HV™1 3D nuclear staining kit (Product No. C3709)
Process outline
Delipidation
Perfusion fixation and dissection of the mouse brain
Post-fix <24 h
Wash (PBS) 2 h x3
Delipidation (CUBIC-L; Product No. T3740) 3-7 days
Wash (PBS) 2 h x3
Nuclear staining by CUBIC-HV™1 3D nuclear staining kit (Product No. C3709)
Nuclear staining (DAPI or Propidium Iodide or others in CUBIC-HV™1 3D nuclear staining buffer) 3-5 days
Wash (3D nuclear staining wash buffer; 10mM HEPES buffer, pH 7.5) 2 h x3
Optional process; Enzyme reaction
Immunostaining by CUBIC-HV™1 3D immunostaining kit (Product No. C3708)
Primary antibody (anti-NeuN antibody in C3708 kit can be used): 5 µg/whole brain
Secondary antibody: anti-Fc Fab (out of the kits), 3.75 µg/whole brain
Primary antibody + secondary antibody reaction / Replacement with CUBIC-HV™1 3D immunostaining buffer, 1.5 h
Immunostaining (CUBIC-HV™1 3D immunostaining buffer with CUBIC-HV™1 3D immunostaining additive (if required)), >1 week
Reaction in the same buffer at 4°C, 1 day
Wash (CUBIC-HV™1 3D immunostaining wash buffer), 2 h x3
Fix and RI matching
Post-fix (in 1% Formaldehyde Solution), 1 day
Wash (PBS) 2 h
RI matching (CUBIC-R+; Product No. T3740), <3 days
Microscopic observation
Related Products
T3740 Tissue-Clearing Reagent CUBIC-L [for delipidation and decoloring]
T3741 Tissue-Clearing Reagent CUBIC-R+ [for RI matching]
C3708 CUBIC-HV™1 3D immunostaining kit
F0622 37% Formaldehyde Solution
H0396 HEPES
เอกสารอ้างอิง
E. A. Susaki, C. Shimizu, A. Kuno, K. Tainaka, X. Li, K. Nishi, K. Morishima, H. Ono, K. L. Ode, Y. Saeki, K. Miyamichi, K. Isa, C. Yokoyama, H. Kitaura, M. Ikemura, T. Ushiku, Y. Shimizu, T. Saito, T. C. Saido, M. Fukayama, H. Onoe, K. Touhara, T. Isa, A. Kakita, M. Shibayama, H. R. Ueda, Nat. Commun. 2020, 11, 1982.